正文援用：馬曉飛, 胡家麗, 崔曼曼, 葛巍, 楊蘇琴, 丁成華, 張磊昌. 糞菌移植對各別潰瘍性乙狀結(jié)腸炎小鼠的醫(yī)療效果及個中酒性味接洽. 華夏全科醫(yī)術(shù)[J], 2022, 25(15): 1875-1882 doi:10.12114/j.issn.1007-9572.2022.02.025

MAXiaofei, HUJiali, CUIManman, GEWei, YANGSuqin, DINGChenghua, ZHANGLeichang. Medicinal Flavor of Fecal Microbiota and Efficacies of Its Transplantation in Mice with Different Types of Ulcerative Colitis. Chinese General Practice[J], 2022, 25(15): 1875-1882 doi:10.12114/j.issn.1007-9572.2022.02.025

潰瘍性乙狀結(jié)腸炎（ulcerative colitis，UC）是一種耐性非奇異性免疫性性病癥，從屬于炎癥性腸病（inflammatory bowel disease，IBD）的范圍，是消化體例的罕見病及疑義病[1,2]，重要以腹痛、瀉肚、黏液膿血便、里急后重等臨床展現(xiàn)為主[3]，重復爆發(fā)是該病癥特性，多見于直腸和乙狀乙狀結(jié)腸，青丁壯為好發(fā)人群。UC的發(fā)病暫時在全寰球呈逐年飛騰的趨向，但UC的病源、發(fā)病體制尚不精確。新穎醫(yī)術(shù)覺得與遺傳、情況、情緒等成分關(guān)系，從而引導腸黏膜樊籬受損，神經(jīng)內(nèi)滲透功效失融合免疫性失衡，進而惹起腸黏膜限制潰瘍而發(fā)病[4]。

UC暫時還沒有治愈的本領(lǐng)，基礎(chǔ)調(diào)節(jié)規(guī)則以遏制癥候為主，調(diào)節(jié)藥物囊括氨基酸水楊酸藥劑、糖皮質(zhì)荷爾蒙類、免疫性控制劑及底棲生物藥劑等[5,6]。慣例藥物不良反饋較強，且病況簡單重復，底棲生物藥劑價錢高貴，財經(jīng)本錢太高。連年來，糞菌移植（fecal microbiota transplantation，F(xiàn)MT）變成接洽搶手話題，其道理為將安康人糞便中的功效菌群，移植入患者胃腸道內(nèi)，重修具備平常功效的腸道菌群，調(diào)節(jié)腸道及腸道外某些病癥。該本領(lǐng)來由已久，2013年美利堅合眾國食物方劑監(jiān)視處置局將調(diào)節(jié)難辨梭狀芽孢桿菌熏染寫入指南，是對其安定性及靈驗性的認證，符合證獲得進一步擴充[7,8]。普遍鴻儒雖仍舊證明FMT調(diào)節(jié)UC醫(yī)療效果的真實性，但仍有局部鴻儒對FMT調(diào)節(jié)UC的醫(yī)療效果提出置疑，說其總體有功效偏低。

對準FMT調(diào)節(jié)UC醫(yī)療效果良莠不齊的因為，筆者鑒于國醫(yī)表面，發(fā)現(xiàn)款汁與FMT有殊途同歸之效[9]。本接洽鑒于此，以陰性藥物5-氨基酸水楊酸（5-ASA）為試驗比較，經(jīng)過FMT調(diào)節(jié)普遍型潰瘍性乙狀結(jié)腸炎模子（CUCM）與濕熱型潰瘍性乙狀結(jié)腸炎模子（DUCM），考證其醫(yī)療效果，經(jīng)過調(diào)節(jié)前后病癥震動指數(shù)、腸構(gòu)造HE染色、腸構(gòu)造透射電子顯微鏡、血慣例及菌群百般性領(lǐng)會等商量FMT（新金汁）的國藥性味。

1　資料與本領(lǐng)1.1　試驗眾生雄性SPF級C57BL/6小鼠（4周齡）：湖南斯萊克景達試驗眾生有限公司，承諾證號：SCXK（湘）2019-0004，平衡體品質(zhì)（18.0±1.2）g。本接洽經(jīng)江西國醫(yī)藥大學醫(yī)術(shù)倫理查看委員會審查批準經(jīng)過。

1.2　試驗試藥與儀器葡聚糖硫酸鈉（DSS）（9011-18-1，上海源葉底棲生物高科技有限公司）；5-ASA（貨號：89-57-6，上海源葉底棲生物高科技有限公司）；高脂高糖草料（配方：糖15%、大油10%、膽固醇4%、膽鹽0.3%、卵黃粉10%、普通草料60.7%，南京盛民科學研究眾生繁育場）；便隱血（OB）試藥（B200101，珠海貝索底棲生物）；水合氯醛（119957，上海展云化學工業(yè)有限公司）；異氟烷（S10010533，上海玉研科學儀器有限公司）；干預素γ（IFN-γ）PE（505808，Biolegend）；CD4 APC-CY7（100460，Biolegend）；白介素（IL）-4 PE（504104，Biolegend）；小鼠IL-2試藥盒（MM-0701M1）；小鼠IL-4試藥盒（MM-0165M1）；蘇木素染液（ZLI-9610，北京中杉金橋底棲生物本領(lǐng)有限公司）；伊紅染色液（G1100，Solarbio）；超凈高檔封片膠（YZB，BASO）；Scott藍化液（G1865，Solarbio）；人為氣象箱（PRX-80A，江蘇天翎儀器有限公司）；眾生透氣麻醉機（ABM-100，上海玉研科學儀器有限公司）；透射電子顯微鏡（JEM-1230，JEOL）；多功效酶標儀（S/N502000011，TECAN）；顯微鏡（CX41 OLYMPUS）；切片機（BQ-318D，伯納）；眾生血液細胞領(lǐng)會儀（XFA6030普朗調(diào)理）[10]。

1.3　模子創(chuàng)造1.3.1　CUCM將小鼠符合性豢養(yǎng)7 d后，置于鼠籠豢養(yǎng)IVC體例（樹立參數(shù)如次：溫度20 ℃、濕度45%，每天連接12 h）中豢養(yǎng)，賦予普遍草料豢養(yǎng)并賦予小鼠自在飲含2% DSS蒸餾水，貫串豢養(yǎng)10 d即可。

1.3.2　DUCM將小鼠符合性豢養(yǎng)7 d后，置于鼠籠豢養(yǎng)IVC體例（樹立參數(shù)如次：溫度36 ℃、濕度80%，每天連接12 h）中豢養(yǎng)，賦予高脂高糖草料（配方：糖15.0%、大油10.0%、膽固醇4.0%、膽鹽0.3%、卵黃粉10.0%、普通草料60.7%），并賦予小鼠自在飲含2% DSS蒸餾水，貫串豢養(yǎng)10 d即可。

造模后，CUCM與DUCM辨別取2只小鼠舉行查看，取樣舉行模子考證，經(jīng)過小鼠病癥震動指數(shù)評閱（體品質(zhì)低沉分數(shù)、大解性狀分數(shù)、便血分數(shù)）和小鼠的普遍情景變革（體品質(zhì)、便血、瀉肚、背毛無光彩、拱背、懶動及肛溫升高檔）來確定造模能否勝利。

1.3.3　糞菌制備取平常比較小鼠的5 g陳腐晨便標本溶于10 ml無菌PBS中充溢混勻，辨別用2.0、1.0、0.5、0.25 mm的不銹鋼篩過濾，6 000×g離心15 min，取菌體，用無菌PBS蕩滌3次，重懸于25 ml PBS中4 ℃冰箱生存。

1.4　試驗分批于2019年12月9—28日，按照造模需要舉行對準性造模，再分為7組，每組各5只小鼠。

1.4.1　平常比較組（Control組）Control組不做任何干涉處置，賦予小鼠自在飲用平常水，普遍草料豢養(yǎng)，常溫、常態(tài)下豢養(yǎng)（溫度、濕度樹立同CUCM組），不做其余特出處置。

1.4.2　CUCM組CUCM造模勝利后，常溫、常態(tài)下沿用普遍草料、平常飲水豢養(yǎng)，沿用鹽酸鹽緩沖液（PBS）0.2 ml/次對小鼠舉行灌腸，1次/2 d，連接10 d，合計5次。

1.4.3　CUCM+FMT組CUCM造模勝利后，常溫、常態(tài)下沿用普遍草料、平常飲水豢養(yǎng)，賦予制備的糞菌液0.2 ml對小鼠舉行灌腸，1次/2 d，連接10 d，合計5次。

1.4.4　CUCM+5-ASA組CUCM造模勝利后，常溫、常態(tài)下沿用普遍草料、平常飲水豢養(yǎng)，按0.195 g/kg的劑量，藥物濃淡為0.019 5 g/ml，即20 g小鼠灌腸0.2 ml，1次/2 d，連接10 d，合計5次。

1.4.5　DUCM組DUCM造模勝利后，常溫、常態(tài)下沿用普遍草料、平常飲水豢養(yǎng)，沿用PBS 0.2 ml/次對小鼠舉行灌腸，1次/2 d，連接10 d，合計5次。

1.4.6　DUCM+FMT組DUCM造模勝利后，常溫、常態(tài)下沿用普遍草料、平常飲水豢養(yǎng)，賦予制備的糞菌液0.2 ml對小鼠舉行灌腸，1次/2 d，連接10 d，合計5次。

1.4.7　DUCM+5-ASA組DUCM造模勝利后，常溫、常態(tài)下沿用普遍草料、平常飲水豢養(yǎng)，按0.195 g/kg的劑量，藥物濃淡為0.019 5 g/ml，即20 g小鼠灌腸0.2 ml，1次/2 d，連接10 d，合計5次。

1.5　眾生取樣給藥中斷后，將各組大鼠用10%水合氯醛按400 mg/kg腹腔打針麻醉，打啟動物的腹腔及胸腔；將乙狀結(jié)腸和盲腸掏出，外表血印清洗純潔，用無菌棉簽抽出腸道實質(zhì)物，沿用16S rRNA高通量測序本領(lǐng)測定菌群百般性。實質(zhì)物掏出后切去盲腸，將結(jié)余的乙狀結(jié)腸和直腸分為3份，辨別用來HE染色、透射電內(nèi)窺鏡檢查測、流式細胞檢驗和測定。

1.6　HE染色掏出各組構(gòu)造樣本清流清洗數(shù)鐘點，經(jīng)70%、80%、90%各級乙醇溶液脫水，純乙醇、二甲苯等量攙和液15 min，二甲苯Ⅰ 15 min、Ⅱ 15 min（至通明為止）。放入二甲苯和白臘參半的攙和液15 min，再放入白臘Ⅰ、白臘Ⅱ透蠟各50~60 min。白臘包埋，切片。將白臘切片舉行烤片，而后脫蠟，水化。將已入蒸餾水的切片放入蘇木素水溶液中染色3 min，鹽酸乙醇分裂液分裂15 s，稍干洗，返藍液返藍15 s，清流清洗，伊紅染色3 min，清流清洗，脫水，通明，封片，內(nèi)窺鏡檢查。

1.7　透射電子顯微鏡查看各組構(gòu)造樣本2.5%戊二醛恒定2 h之上，用0.1 mmol/L PBS漂洗，1%鋨酸恒定液恒定2 h，0.1 mmol/L鹽酸漂洗梯度乙醇（50%~90%）溶液脫水，再鹽酸安非拉酮脫水，包埋固化，切片切成厚薄為70 nm裂片。3%乙酸鈾-枸櫞酸鉛雙染，透射電子顯微鏡查看。

1.8　流式細胞檢驗和測定扶助性T細胞（Th）1細胞檢驗和測定：各組取100 μl血液至于12孔板中，介入150 μl 1640實足培植基，介入1 μl PMA/Ionomycin mixture佛波酯/離子霉素攙和物，放入培植箱中孵育30 min后介入1 μl BFA/Monensin Mixture，放入培植箱中孵育24 h。中斷后，將血液轉(zhuǎn)至EP管中離心，棄150 μl上清，將細胞吹勻介入CD4 APC-CY7各5 μl，避光孵育15 min，1 ml PBS，400×g離心5 min洗2次，棄上清。介入500 μl Fixation and Permeabilization Solution避光恒定破膜40 min，400×g離心5 min后，介入1 ml 1×BD Perm/WashTM buffer，蕩滌2次，再100 μl 1×BD Perm/WashTM buffer重懸細胞，介入5 μl IFN-γ PE，避光孵育15 min。1 ml 1×BD Perm/WashTM buffer，蕩滌2次，再500 μl 1×BD Perm/WashTM buffer重懸細胞，高貴式儀檢驗和測定。Th2細胞檢驗和測定辦法同上，CD4 APC-CY7孵育重懸后，Th2檢驗和測定介入IL-4 PE孵育。

1.9　血慣例檢驗和測定取各組血液充溢抗凝后，室溫前提下，沿用眾生血液細胞領(lǐng)會儀4 h內(nèi)實行血慣例上機檢驗和測定，重要檢驗和測定白細胞計數(shù)（WBC）、紅細胞計數(shù)（RBC）、血小板計數(shù)（PLT）和血紅卵白（HGB）。

1.10　醫(yī)療效果指數(shù)評價比擬各組UC小鼠FMT干涉前后病癥震動指數(shù)的變革，病癥震動指數(shù)從體品質(zhì)變革（體品質(zhì)靜止：0分，體品質(zhì)低沉1%~5%：1分，體品質(zhì)低沉6%~10%：2分，體品質(zhì)低沉11%~15%：3分，體品質(zhì)低沉>15%：4分）、大解性狀（大解平常：0分，大解渙散：2分，瀉肚：4分）、便血（無便血：0分，隱血陰性：2分，顯性出血：4分）3上面舉行歸納評介。病癥震動指數(shù)=（體品質(zhì)低沉分數(shù)+大解性狀分數(shù)+便血分數(shù)）/3。計劃CUCM及DUCM的醫(yī)療效果指數(shù)，按照尼莫地平法：醫(yī)療效果指數(shù)=（調(diào)節(jié)后病癥震動指數(shù)-調(diào)節(jié)前病癥震動指數(shù)）/調(diào)節(jié)前病癥震動指數(shù)×100%，比擬FMT干涉CUCM及DUCM的醫(yī)療效果指數(shù)分辨。

1.11　16S rRNA高通量測序本領(lǐng)測定菌群百般性各組小鼠腸道實質(zhì)物過濾后，分為3個丈量組，辨別為1、2、3，索取總DNA分光燈光計舉行定量。常常以微底棲生物核糖體RNA等不妨反應(yīng)菌群構(gòu)成和百般性的目的序名列靶點，按照序列中的頑固地區(qū)安排相映引物，舉行PCR擴大與增加。PCR擴大與增加產(chǎn)品經(jīng)過2%瓊脂糖凝膠電泳舉行檢驗和測定，并對目的片斷舉行切膠接收，將PCR擴大與增加接收產(chǎn)品舉行熒光定量，之保守行高通量測序。運用QIIME軟硬件，挪用UCLUST這一序列比對東西，高通量測序所得的序列按97%的序列一致度舉行合并和OTU分別，并采用每個OTU中豐度最高的序列動作該OTU的代辦序列，而后比對RDP（Ribosomal Database Project）數(shù)據(jù)庫獲得分門別類審定截止。

1.12　統(tǒng)計學本領(lǐng)沿用SPSS 19.0軟硬件舉行統(tǒng)計學領(lǐng)會，計量材料以（x±s）表白，多組間比擬沿用單成分方差領(lǐng)會，組間兩兩比擬沿用LSD-t檢查。以P<0.05為分別有統(tǒng)計學意旨。

2　截止各組小鼠均造模勝利。

2.1　HE染色領(lǐng)會各組小鼠腸構(gòu)造HE染色表露：Control組大鼠乙狀結(jié)腸黏膜完備，腺體陳設(shè)一律，無炎性細胞浸濕，檔次精細，構(gòu)造明顯；CUCM組與DUCM組腸黏膜外表展示各別水平的缺損或零落壞死，局部產(chǎn)生潰瘍，隱窩消逝，固有層洪量炎性細胞浸濕，黏膜肌層增厚水腫，黏膜基層血管蔓延，較多紅細胞、嗜酸粒細胞浸濕；CUCM+FMT組、CUCM+5-ASA組、DUCM+FMT組、DUCM+5-ASA組腸黏膜基礎(chǔ)完備，極少量仍見殘破斷裂，腺體增生，陳設(shè)尚一律，杯狀細胞增加，出血點消逝，看來小批炎性細胞浸濕，而且DUCM+FMT組與CUCM+FMT組比擬，前者腺體較后者陳設(shè)一律并精細，殘破斷裂也較后者少，見圖1。

Figure 1

Figure 1 Morphology of intestinal tissue of mice in each group stained with H&E

2.2　透射電子顯微鏡領(lǐng)會各組腸構(gòu)造透射電子顯微鏡超微構(gòu)造表露：Control組微絨毛樣式準則，陳設(shè)一律，較多杯狀細胞，線粒體充分，嵴構(gòu)造領(lǐng)會，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)未見變換；CUCM組與DUCM組上皮細胞外表微絨毛稠密，是非紛歧，樣式不準則，細胞貫穿間歇增寬，杯狀細胞縮小，胞漿內(nèi)有空泡，線粒體腫脹，局部嵴消逝，部分內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蔓延或呈空泡變革；CUCM+FMT組、CUCM+5-ASA組、DUCM+FMT組、DUCM+5-ASA組微絨毛較為精致，樣式平常，杯狀細胞數(shù)量較多，線粒體微弱腫脹，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)病變不鮮明，而且DUCM+FMT組與CUCM+FMT組比擬，前者的微絨毛較后者精細，杯狀細胞也較后者多，見圖2。

Figure 2

Figure 2 Ultrastructural observation of intestinal tissues of mice in each group by transmission electron microscope

2.3　流式細胞檢驗和測定各組小鼠Th1、Th2細胞含量比擬，分別均有統(tǒng)計學意旨（P<0.001），見表1。

Table 1 Comparison of Th1 and Th2 cell contents in intestinal tissues of mice in each group

2.4　血慣例檢驗和測定各組小鼠WBC、RBC、PLT、HGB比擬，分別均有統(tǒng)計學意旨（P<0.001），見表2。

Table 2 Comparison of routine blood of mice in each group

2.5　醫(yī)療效果指數(shù)領(lǐng)會CUCM+FMT組醫(yī)療效果指數(shù)為（-31.03±4.71）%，CUCM+5-ASA組醫(yī)療效果指數(shù)為（-62.53±7.53）%，DUCM+FMT組醫(yī)療效果指數(shù)為（-56.58±13.29）%，DUCM+5-ASA組醫(yī)療效果指數(shù)為（-50.47±20.86）%，各組醫(yī)療效果指數(shù)比擬，分別有統(tǒng)計學意旨（F=5.41，P=0.009）；個中CUCM+5-ASA組、DUCM+FMT組、DUCM+5-ASA組醫(yī)療效果指數(shù)高于CUCM+FMT組，分別均有統(tǒng)計學意旨（P<0.05）。

2.6　菌群百般性領(lǐng)會對各組小鼠腸實質(zhì)物舉行菌群百般性領(lǐng)會，個中Rank-abundance弧線表白物種的充分水平（圖3a），弧線越寬，表白物種的構(gòu)成越充分，弧線越平整，表白物種構(gòu)成的平均水平越高；非襟懷多維標準領(lǐng)會（圖3b）、Beta百般性PCA因素領(lǐng)會（圖3c）、PCoA主坐標領(lǐng)會（圖3d）表白微底棲生物部落一致度，樣本相互之間靠得越近，表白微底棲生物部落一致度越高。截止表露，CUCM+FMT組、DUCM+FMT組經(jīng)調(diào)節(jié)后有漸漸向Control組逼近的趨向，表白腸道菌群正在革新。

Figure 3

Figure 3 Diversity analysis of intestinal microbiota in mice in each group

對各組樣品屬水等分類分別統(tǒng)計與對立豐度領(lǐng)會，截止表露，相較于Control組，CUCM組中豐度明顯貶低的屬辨別是Ruminococcus、Unclassfied_Lachnospiraceae，明顯升高的屬辨別是Akkermansia、Clostridium_XIVa、Unclassfied_Porphyromonadaceae；相較于Control組，DUCM組中豐度明顯貶低的屬辨別是Helicobacter、Saccharibacteria_genera_incertae_sedis、Ruminococcus，DUCM組中豐度明顯升高的屬辨別是Akkermansia、Bacteroides、Parabacteroides、Klebsiella。過程FMT調(diào)節(jié)后，CUCM+FMT組、DUCM+FMT組有漸漸向Control組逼近的趨向，表白腸道菌群正在革新，見圖4。

Figure 4

Figure 4 Comparative analysis of intestinal microbiota of mice in each group at the genus level

3　計劃暫時對于FMT調(diào)節(jié)UC的體制覺得大概與革新腸道菌群構(gòu)造，酸化腸道控制致病原菌成長，普及腸道抗炎新陳代謝物如短鏈脂肪酸程度，減少有益菌豐度，革新Th1/Th2細胞平穩(wěn)，安排促炎因子與抗炎因子的平穩(wěn)，開辟肌體免疫性體例對腸道菌群爆發(fā)免疫性耐受等多上面相關(guān)[11,12]。

按照本接洽HE染色病道學、透射電子顯微鏡超微構(gòu)造截止領(lǐng)會，F(xiàn)MT對CUCM與DUCM兩種UC模子小鼠均有明顯的醫(yī)療效果，且對DUCM功效優(yōu)于CUCM。流式細胞檢驗和測定截止表白FMT不妨使DUCM模子組中Th1細胞縮小，Th2細胞增加。血慣例表白FMT不妨使UC模子中WBC、PLT下調(diào)，RBC、HGB上調(diào)，而且DUCM組的各項目標革新均優(yōu)于CUCM組。醫(yī)療效果指數(shù)領(lǐng)會表白DUCM組的醫(yī)療效果指數(shù)高于CUCM組。同聲菌群百般性截止也表露FMT不妨使UC模子中的菌群趨于平常。

T淋巴液細胞在肌體的免疫性應(yīng)答和免疫性安排效率中吞噬著中心底位，Th細胞為初始CD4+T細胞活化后分裂而成的效力細胞，其經(jīng)過開釋細胞因子、扶助B細胞活化爆發(fā)抗原，以及和細胞間徑直交戰(zhàn)的辦法表現(xiàn)免疫性效力[13]。在遭到各別本質(zhì)抗原和限制微情況中細胞因子調(diào)節(jié)和控制后，Th細胞重要可分裂為Th1、Th2等兩個亞型。Th1細胞以滲透IL-2、IFN-γ等為主，介入細胞免疫性應(yīng)答、炎性反饋和慢性擯棄反饋進程；Th2細胞以滲透IL-4、IL-5為主，介入津液免疫性應(yīng)答[14,15]。按照接洽UC模子中Th1細胞及Th2細胞，經(jīng)FMT調(diào)節(jié)后，DUCM模子組Th1/Th2平穩(wěn)更趨于Control組。

腸道菌群凌亂與多種病癥的爆發(fā)有出色接洽，如哮喘、強壯、糖尿病等，更加是胃腸類病癥[16]。有接洽表白，大腸濕熱證UC患者與安康人腸道菌群的分別鮮明：個中，大腸濕熱證UC患者的Bacteroidetes和Firmicutes的細菌均低于安康人，然而Proteobacteria和Verrucomicrobia的比率高于安康人且大腸濕熱證UC患者的百般性平均高度于安康人腸道樣品[17]。按照本接洽的菌群分別截止表露，屬程度分別明顯的是Ruminococcus與Akkermansia，估計大概與病癥的爆發(fā)及調(diào)節(jié)相關(guān)。

綜上可知，F(xiàn)MT調(diào)節(jié)UC模子小鼠功效鮮明，而且對準DUCM優(yōu)于CUCM。反之，苦味具備清瀉、燥濕效率，普遍清熱、瀉火、燥濕、通便藥物均具備苦味，苦味藥主人治熱證、火證及濕證。按照國醫(yī)八綱辨證施治表面"寒者熱之，熱者寒之"，即熱證、火證均不妨運用具備寒涼屬性的藥物治之。按照本接洽證明FMT對DUCM醫(yī)療效果優(yōu)于CUCM，從而按照國醫(yī)藥表面推導，新金汁屬于國藥中的嚴寒之物。本接洽為FMT調(diào)節(jié)UC供給了表面按照，也為FMT（新金汁）的國藥性味嚴寒供給了表面按照，但還需深刻接洽。

正文無便宜辯論。

正文表格略

參考文件略

糞菌移植對各別潰瘍性乙狀結(jié)腸炎小鼠的醫(yī)療效果及個中酒性味接洽

專題推薦：

江門回收廢鋁

江門回收廢銅

江門回收廢鐵

江門回收廢紙

江門廢紙回收

江門廢塑料回收

江門廢銅回收

江門廢鋁回收

江門廢鐵回收

中山廢品回收

廣東廢品回收

江門廢品回收

江門起重機安裝

江門廢品站